期刊简介
《中华临床营养杂志》1993年创刊，是中华医学会和中国医学科学院共同主办的我国第一本传播有关临床营养支持、各种营养素的代谢、营养支持对结局和“成本-效果”影响以及转化医学与营养研究等方面信息的专业性学术期刊（双月刊），也是中华医学会肠外肠内营养学分会的专业期刊。
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首页>中华临床营养杂志
- 杂志名称：中华临床营养杂志
- 主管单位：中国临床营养杂志
- 主办单位：中国科学技术协会
- 国际刊号：11-5822/R
- 国内刊号：11-4004/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国学术期刊（光盘版）全文收录期刊期刊收录：上海图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 哥白尼索引(波兰), 万方收录(中)
实时定量PCR检测外科发热患者静脉血中大肠杆菌DNA的方法
李云玖；马恩陵；廉东波；张立阳；王秀荣；何桂珍；蒋朱明
关键词：实时定量PCR, 大肠杆菌, DNA, 肠黏膜屏障, 发热, 血, 体液
摘要：目的建立实时定量PCR(RQ-PCR)检测大肠杆菌DNA的方法,评估临床标本检测效果.方法选择大肠杆菌β-右旋半乳糖苷酶基因作为检测靶基因设计引物和探针,采用High Pure PCR Template Preparation Kit提取基因组DNA,建立20μl TaqMan探针RQ-PCR反应体系.对26份外科发热患者标本(血标本20份,腹腔引流液3份,胸水2份,胆汁1份)进行荧光RQ-PCR检测.结果引物和探针特异性好,标准曲线相关系数在0.991～0.999之间.在低检测限(102拷贝/反应体系)以上,仪器对不同含量大肠杆菌样本检测的平均准确性为(112.19±7.48)%;批内及批间重复性平均变异系数(CV)分别为(16.33±4.80)%和(16.03±7.80)%.血标本中大肠杆菌DNA平均提取效率为(38.40±14.05)%,提取效率平均CV为(20.57±16.92)%.含有同等量大肠杆菌模拟标本存放在-20℃或-70℃6个月内,大肠杆菌DNA拷贝数差异无显著性(P=0.130).外科发热患者血中大肠杆菌阳性率高达30%,高含量约为1.24×106个/ml;另外在胆汁及腹腔引流液标本中检测出的大肠杆菌DNA含量明显高于相同患者血中含量.结论RQ-PCR是一种快速、灵敏、特异、重复性好、能定量起始模板拷贝数的检测大肠杆菌DNA方法,可用于定量检测全血及其他体液标本中大肠杆菌含量.
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